《科学养羊实用技术》:
1.供体母羊的选择
选择供体的首要条件是其遗传品质(生产性能)优秀,个体大、体型结构好,遗传性稳定,系谱清楚,具有较高的种用价值或生产性能;繁殖机能正常、泌乳能力强,有一胎以上正常繁殖史的空怀母畜,既往繁殖力较高;健康无病,生殖器官正常,观察两次发情,间隔正常。重复超排的供体,应选产胚多,反应敏感,最好是对超数排卵反应好的母羊,内分泌和生理机能稳定,营养状况适宜,没有传染病、难产和繁殖病史。
2.受体羊的选择
胚胎移植中对受体的要求主要是健康状况和繁殖性能,对品种和生产性能一般不作要求。故受体应选择体况良好、性情温顺、母性好、健康无病(布鲁氏菌病、寄生虫病、产科疾病、生殖道疾病、习惯性流产等疾病)、生理系统正常、发情周期明显,注意不可接触公畜,营养均衡,膘情正常,利于受胎,最好是经产母羊。体况差、有繁殖障碍或其他疾病、年老体衰或年幼母畜,都不宜选作受体。选择受体时虽对品种不作要求,但不同品种繁殖力不同,应尽可能选择繁殖力高的品种作受体。此外,考虑到分娩问题,不宜选用体型过小或后备母畜作受体。
3.供体羊超排处理和人工授精
超数排卵是指在母畜发情周期中选择适当时间,注射外源促性腺激素使卵巢比自然状态产生较多的卵泡发育并排卵的一项技术。
哺乳动物的卵巢在出生时含有20万-40万个卵母细胞,但在动物经过自然发情排卵后排出的卵子仅有数十个。应用超排技术可使每次排卵由1-3个增至10-20个,这样可以开发利用卵巢上的卵母细胞资源,提高母畜的繁殖能力。迄今为止,超数排卵仍然是获得大量整齐、优质的卵子或胚胎的适用方法,同时也是进行胚胎移植、转基因动物、克隆等研究的基础之一。胚胎分割和卵子体外受精技术所需设备条件和操作技术要求较高,在现实生产条件下难以办到,只能作为胚胎来源的补充,超排仍是胚胎移植的重要技术环节。达到性成熟母羊的卵巢上,具有一层以上细胞围成的原始卵泡8万-12万个,具有3-4层颗粒细胞围成的卵泡和次级卵泡数有100-400个。但是母羊排卵数远远小于出现的大卵泡数,大部分卵泡在发育过程中闭锁或消失。有研究表明,有腔卵泡会因外源性促性腺激素的刺激而排卵,而有腔卵泡的形成及生长期卵泡的发育,又完全受卵泡刺激素和促黄体生成素的控制。在自然状态下,动物卵巢上约99%的有腔卵泡发生闭锁退化,仅有1%可以发育成成熟排卵。每次发情期之前优势卵泡加速生长,利用了全部促性腺激素,致使其余小的有腔卵泡发生闭锁退化。超数排卵就是应用超过体内正常水平的外源促卵泡激素,促使99%将要闭锁卵泡正常发育,并于排卵前注射促黄体生成素类制剂,补充内源性促黄体生成素的不足(也有人认为不必补充外源性促黄体生成素),以确保所有成熟卵泡可以同时排出。
(1)用于超排的主要激素。
卵泡刺激素:是一种较为常用的超排激素,由于其在动物体内的半衰期短,因此须定时定量多次注射,处理程序繁琐。其优点是药效比较稳定,超排效果较好。缺点是工作量大,操作繁琐。
孕马血清促性腺激素:一种糖蛋白激素,是动物中广泛应用的超排激素,具有卵泡刺激素和促黄体生成素双重作用,但由于其分子中N-乙酰-神经氨酸含量较高,使孕马血清促性腺激素在动物体内半衰期较长,高于促黄体生成素。因此,对使用剂量要求较为严格,受其半衰期长的影响,在注射剂量较高时容易导致卵巢囊肿、黄体早期退化、胚胎发育异常、超数排卵的季节性变异范围大等问题的发生。这些不仅影响超数排卵的效果,同时对胚胎质量也会造成一定的影响。其优点是成本较低、节省人力资源;缺点是超排效果不够稳定。近年来有研究发现,研制成抗孕马血清促性腺激素,中和母畜排卵后血循环中残留的孕马血清促性腺激素,收到较好效果。
前列腺素及其类似物:其主要作用是溶解黄体,使供体、受体在预定时间内发情,增强超排效果。
促黄体生成素:常与卵泡刺激素配合使用,促黄体生成素可和卵泡刺激素协同作用促进卵泡成熟、触发排卵、促进黄体形成并分泌雌激素和孕激素,在动物的生殖过程中发挥重要作用。促黄体生成素峰值是控制排卵发生的关键因素,注射外源性促黄体生成素增加卵巢血液供应,诱发排卵。
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