第一篇 文献检索与选题篇
第一章 文献检索/ 2
第 1节 中文文献检索 /2
第 2节 PubMed文献检索 /13
第 3节 Web of Science文献检索 /18
第二章 知云文献翻译软件使用/ 27
第三章 医学科研选题/ 31
第二篇 实验技术篇
第一章 核酸提取和定量/ 34
第 1节 真核细胞基因组DNA提取 /34
第 2节 真核细胞总RNA提取 /37
第 3节 凝胶中DNA的回收 /41
第 4节 质粒DNA小量提取 /42
第 5节 碱裂解法提取质粒详解 /44
第 6节 质粒DNA大量提取(碱裂解法) /46
第二章 核酸体外扩增/ 48
第 1节 PCR引物设计和特异性验证 /48
第 2节 OligoCalc引物分析 /57
第 3节 基础PCR /59
第 4节 高GC含量PCR体系 /64
第 5节 逆转录PCR /65
第 6节 miRNA PCR扩增 /67
第 7节 实时定量PCR /70
第 8节 巢式PCR /73
第 9节 降落PCR /75
第三章 核酸分离纯化和分析/ 78
第 1节 琼脂糖凝胶电泳 /78
第 2节 琼脂糖凝胶中DNA染色检测 /80
第 3节 聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA检测 /83
第 4节 核酸纯化 /86
第 5节 单链构象多态性分析 /91
第四章 质粒载体克隆和转化/ 94
第 1节 重组质粒构建 /94
第 2节 大肠埃希菌感受态细胞制备 /96
第 3节 质粒转化大肠埃希菌及菌落PCR鉴定 /97
第五章 序列分析/ 100
第 1节 桑格-库森法测序 /100
第 2节 TA克隆法测序 /104
第 3节 Chromas序列查阅 /110
第六章 真核细胞中导入基因/ 113
第 1节 磷酸钙法转染真核细胞 /113
第 2节 聚乙烯亚胺协助转染 /115
第七章 蛋白质提取和定量/ 118
第 1节 细胞蛋白质提取 /118
第 2节 蛋白质定量 /120
第 3节 C12多肿瘤标志物联合检测 /122
第八章 蛋白质相关分析/ 125
第 1节 蛋白质印迹法 /125
第 2节 蛋白质印迹法常用试剂配制 /130
第 3节 免疫沉淀法和免疫共沉淀法 /138
第 4节 免疫荧光技术 /140
第 5节 酶联免疫吸附测定 /142
第九章 DNA-蛋白质相互作用 /146
第 1节 电泳迁移率变动分析 /146
第 2节 染色质免疫沉淀法 /150
第 3节 双荧光素酶报告基因实验 /154
第十章 细菌接种、培养和鉴定 /157
第 1节 手卫生(七步洗手法) /157
第 2节 细菌培养基制备 /158
第 3节 细菌冻存和复苏 /160
第 4节 细菌接种技术 /161
第 5节 细菌涂片制作 /163
第 6节 细菌革兰氏染色 /164
第十一章 细胞培养/ 166
第 1节 细胞冻存与复苏 /166
第 2节 原代细胞培养 /168
第 3节 脐带血内皮克隆形成细胞培养 /169
第 4节 细胞传代 /171
第 5节 悬浮细胞培养 /172
第 6节 海拉细胞培养 /174
第 7节 细胞培养中微生物污染控制 /175
第十二章 细胞活力检测/ 178
第 1节 噻唑蓝比色实验 /178
第 2节 流式细胞术 /179
第 3节 细胞划痕实验 /181
第 4节 细胞迁移和侵袭实验(Transwell法) /182
第 5节 细胞黏附实验 /185
第十三章 组织病理技术/ 187
第 1节 组织取材和固定 /187
第 2节 组织病理制片 /189
第 3节 组织切片苏木精-伊红染色和 Masson三色染色 /191
第 4节 病理切片封片 /193
第 5节 免疫组织化学技术 /196
第 6节 荧光原位杂交 /200
第 7节 原位杂交(地高辛法) /203
第 8节 4% 多聚甲醛配制方法 /206
第十四章 常用动物实验技术/ 209
第 1节 常用实验动物抓取和固定 /209
第 2节 常用实验动物性别鉴定 /210
第 3节 常用实验动物标记方法 /211
第 4节 小鼠饲养和繁殖 /213
第 5节 鼠尾基因组DNA快速提取 /215
第 6节 试剂盒提取动物组织基因组DNA /217
第 7节 基因工程小鼠基因型鉴定 /219
第 8节 大、小鼠眼眶后静脉丛采血 /221
第 9节 家兔心脏采血 /222
第 10节 大、小鼠灌胃方法 /223
第 11节 大鼠皮下注射 /224
第 12节 大、小鼠腹腔注射 /225
第 13节 小鼠尾静脉注射 /226
第 14节 家兔灌胃方法 /228
第 15节 家兔肌内注射 /229
第 16节 家兔静脉注射 /230
第 17节 小鼠心脏灌流固定 /231
第 18节 小鼠安乐死法 /232
第三篇 实验仪器使用篇
第一章 消毒和灭菌技术仪器/ 236
第 1节 独立通气笼盒系统 /236
第 2节 高压蒸汽灭菌器 /237
第 3节 脉动真空灭菌器 /240
第 4节 细菌过滤器 /241
第二章 离心分离技术仪器/ 243
第 1节 小型高速低温离心机 /243
第 2节 中型冷冻高速离心机 /244
第 3节 多管架自动平衡离心机 /245
第三章 定量技术仪器/ 248
第 1节 电子分析天平 /248
第 2节 紫外透射仪 /249
第 3节 分光光度计 /250
第 4节 核酸蛋白检测仪 /252
第 5节 EnVision多功能酶标仪 /253
第 6节 流式细胞仪 /255
第 7节 LC-10A 高效液相色谱仪 /258
第 8节 API 4000液质联用仪 /261
第四章 电泳技术仪器/ 266
第 1节 电泳仪 /266
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