《生物化学与分子生物学实验》共包括3个部分、27个实验。针对乳酸脱氢酶的一系列生物化学、分子生物学、生物信息学实验进行系统性编排。在每个实验后都有实验拓展,便于学生课后更深入地自学,牢固地掌握所学知识。在实际教学过程中,根据教学大纲和实验条件,任课教师可以选择其中单个项目进行实验教学,也可以选择多个项目构建成一个综合性的实验课题进行授课。
第一部分的生物化学实验包括LDH的提取与鉴定,离子交换层析法纯化LDH,亲和层析法纯化LDH,凝胶过滤层析法纯化LDH,蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法),LDH酶活力测定,非变性凝胶电泳分离LDH同工酶,聚丙烯酰胺凝胶电泳测定LDH相对分子质量,LDH蛋白质免疫印迹9个实验项目。通过该部分实验,学生将掌握蛋白质提取和纯化、蛋白质浓度测定、酶活力检测、蛋白质相对分子质量测定以及免疫印迹等生物化学实验技术的原理和操作方法。
第二部分的分子生物学实验包括动物组织基因组DNA提取,PGR扩增LDH基因,琼脂糖凝胶电泳检测DNA,提取纯化质粒载体,DNA限制性酶切,制备大肠杆菌感受态细胞,DNA重组、转化及阳性克隆筛选,外源基因的原核表达及纯化8个实验项目。通过该部分实验,学生将掌握从提取基因组DNA到目的DNA重组、转化、原核表达的分子克隆实验技术的原理和操作方法。
第三部分的生物信息学实验包括PCR引物设计,凝胶电泳图像分析,NCBI数据库介绍及序列下载,序列格式转换,DNA序列分析,序列同源检索,多重序列比对,系统进化分析,蛋白质序列分析,蛋白质结构预测10个实验项目。通过该部分实验,学生不但能够掌握PCR、电泳实验的设计和验证过程,还能系统地学习核酸和蛋白质序列分析、蛋白质结构分析、同源序列检索以及系统进化分析等生物信息学实验技术的原理和操作方法。由于该部分的图均为实验步骤的过程图,因此参考张成岗和贺福初编著的《生物信息学方法与实践》(科学出版社,2002年)未加题图。
该书主要适用于生物学类、农学类、医学类专业的生物化学、分子生物学、生物信息学等课程的实验教学,也可作为生物化学与分子生物学、基因组与生物信息学等专业相关教师及学生的参考用书。
展开