刘欢，博士，汉族，1987年7月生，河南周口人，中共党员。主要从事实蝇类检疫性入侵害虫的化学生态学、行为学和毒理学及其综合防控技术的研究工作，以及植物源杀虫活性化合物的分离、鉴定和毒性机理研究等科研工作。在国内外知名期刊发表学术论文20余篇，其中SCI文章7篇，获得授权发明专利2项，参编专著1部。主持国家自然科学基金、省部级、校级重点科研项目3项。曾获2018年广东省优秀博士毕业生荣誉称号。讲授“农螨学”“农业昆虫学”等本科生课程及承担“植物保护学研究进展”“分子生物学研究进展”和“农化产品高效利用与管理”等研究生课程。

第1章　绪论 001
1.1 橘小实蝇生物学和生态学特性 002
1.1.1　橘小实蝇形态特征与生活习性 002
1.1.2　橘小实蝇生活史 004
1.1.3　橘小实蝇为害特点 005
1.1.4　橘小实蝇适生环境与种群动态 007
1.1.5　橘小实蝇入侵风险评估及适生性分析 007
1.1.6　橘小实蝇综合控制策略 009
1.1.7　橘小实蝇化学生态学研究概述 017
1.2 应用甲基丁香酚防控橘小实蝇的研究进展 028
1.2.1　甲基丁香酚引诱橘小实蝇雄成虫的生理学基础 029
1.2.2　甲基丁香酚诱捕橘小实蝇影响因素及田间应用 030
1.2.3　甲基丁香酚衍生化合物 031
1.2.4　需解决的科学问题 032
1.3 研究目的和研究思路 033
1.3.1　研究目的 033
1.3.2　研究思路 033
1.4 研究技术路线 034
参考文献 035

第2章　气味结合蛋白在橘小实蝇雄成虫识别甲基丁香酚过程中分子功能的研究 052
2.1 引言 053
2.2 材料与方法 054
2.2.1　供试昆虫 054
2.2.2　供试试剂与耗材 054
2.2.3　主要仪器 055
2.2.4　溶液的配置 056
2.2.5　试验方法 057
2.3 结果与分析 072
2.3.1　人工汰选后对甲基丁香酚无趋性雄成虫比例的变化 072
2.3.2　对甲基丁香酚有趋性和无趋性雄成虫触角iTRAQ蛋白组鉴定与结果分析 073
2.3.3　触角差异蛋白GO功能注释与分析 078
2.3.4　触角差异蛋白KEGG通路分析 079
2.3.5　qRT-PCR检测差异蛋白编码基因在有、无趋性雄成虫触角的表达量 080
2.3.6　气味结合蛋白进化树分析 081
2.3.7　性别与日龄对橘小实蝇成虫对甲基丁香酚趋性及OBPs表达量的影响 082
2.3.8　甲基丁香酚显著诱导雄成虫触角OBP2表达量上调 083
2.3.9　OBP2、OBP50c、OB56D-1、OB56D-2生物学功能的研究 085
2.4 气味结合蛋白OBP2调控橘小实蝇雄成虫趋向ME 089
参考文献 091

第3章　气味受体在调控橘小实蝇雄成虫对甲基丁香酚趋性行为的分子功能研究 095
3.1 引言 096
3.2 试验方法 097
3.2.1　供试昆虫 097
3.2.2　供试试剂 097
3.2.3　主要仪器 098
3.2.4　溶液的配置 098
3.2.5　橘小实蝇雄成虫处理与触角样品收集 099
3.2.6　触角总RNA提取、cDNA文库构建及Illumina测序 099
3.2.7　序列De Novo组装和Unigenes功能注释 100
3.2.8　差异表达基因的筛选与分析 101
3.2.9　差异表达基因GO功能注释、GO富集与KEGG富集分析 102
3.2.10　荧光定量PCR（qRT-PCR）验证基因表达量 103
3.2.11　OR63a-1和OR88a基因序列分析与系统发育树构建 104
3.2.12　不同日龄和日节律对橘小实蝇雄成虫对ME的趋性及OR63a-1、OR88a表达量的影响 104
3.2.13　OR63a-1和OR88a在爪蟾卵母细胞表达和双电极电压钳记录 104
3.2.14　RNA干扰验证OR63a-1和OR88a的生物学功能 106
3.2.15　数据分析 106
3.3 试验结果 107
3.3.1　RNA-Seq数据质控与评估 107
3.3.2　不同处理组样本转录组测序与De novo组装分析 109
3.3.3　转录组Unigenes基本功能注释 112
3.3.4　ME处理组与MO对照组橘小实蝇雄成虫触角差异表达基因分析 115
3.3.5　差异表达基因的GO分类、GO富集与KEGG通路富集分析 115
3.3.6　与嗅觉传导相关的差异表达基因鉴定 117
3.3.7　qRT-PCR检测差异基因的表达量 118
3.3.8　气味受体进化树分析 121
3.3.9　日龄和日节律对橘小实蝇雄成虫趋向ME能力及OR63a-1、OR88a表达量的影响 122
3.3.10　爪蟾卵母细胞系统研究OR63a-1、OR88a分子功能 123
3.3.11　OR88a调控橘小实蝇雄成虫对ME的趋性行为 124
3.3.12　橘小实蝇雄成虫识别、转导ME的分子模型 126
3.4 OR88a调控橘小实蝇雄成虫对ME的趋性行为 127
参考文献 128

第4章　结论与讨论、创新点与展望 132
4.1 结论 133
4.2 讨论 134
4.2.1　OBP2参与橘小实蝇雄成虫识别ME的分子过程 134
4.2.2　OR88a调控橘小实蝇性成熟雄成虫对ME的趋性行为 136
4.2.3　橘小实蝇性成熟雄成虫识别ME的分子模型 139
4.3 创新点 140
4.4 展望 140
参考文献 141

附录　嗅觉蛋白质二级质谱图谱 146