《铁道游击队》描述了在抗日战争时期，鲁南枣庄矿区有一批煤矿工人和铁路工人，由于不堪日寇的屠杀和蹂躏，在共产党的领导下，秘密地组织和武装成为一支短小精悍的游击小分队，以打击日伪军的交通线为目的而与日伪势力进行游击斗争的英雄故事。他们配合主力部队，起初在临枣线上展开武装活动，后又发展到去津浦干线上与敌人战斗。他们以短枪和便衣，战斗在敌人据点林立、重兵据守的铁路线上，破铁路、撞火车、搞机枪、夺物资，在火车上打歼灭战，闹得天翻地覆，震撼敌伪。